DNR išskyrimas: Skirtumas tarp puslapio versijų

Ištrintas turinys Pridėtas turinys
Ramujana (aptarimas | indėlis)
Nėra keitimo santraukos
Ramujana (aptarimas | indėlis)
Eilutė 17:
Trys pagrindiniai DNR išskyrimo etapai:
*Ląstelių ir branduolio [[lipidas|lipidinės]] [[membrana|membranos]] suardymas trinant, [[ultragarsas|ultragarsu]] ar [[detergentas|detergentais]] (SDS - Natrio dodecil/lauryl sulfatas); IGEPAL/NONIDET.
*Viduląstelinių ir histoninių [[baltymai|baltymų]] pašalinimas pridėjus '''proteinazę K''' ir juos precipituojant pridėjus [[natris|natrio]] ar amonio acetato, arba taikant '''fenolio-chloroformo-(izoamilo alkoholio)''' išskyrimo etapą (susidaro dvifazis tirpalas: DNR (ir kt. druskos) ištirpsta vandeninėje fazėje, o baltymai lieka organinėje fazėje; žingsniai kartojami; gali būti naudojamas tirpalas 25:24:1).
*DNR precipitacija paveikus šaltu 96º etanoliu ar izopropanoliu (izopropilo alkoholiu) (DNR netirpsta alkoholyje ir iškrenta į nuosėdas; taip pat yra pašalinamos druskos)
**Vėliau DNR kelis kartus perplaunama alkoholiu (70, 96º [[etanolis|etanoliu]])džiovinama ir užpilama TE [[buferis|buferiu]] (šarminis buferis) arba laikoma -20 ištirpinta etanolyje (DNR bankas).