DNR išskyrimas: Skirtumas tarp puslapio versijų
Ištrintas turinys Pridėtas turinys
Nėra keitimo santraukos |
|||
Eilutė 13:
==Principas==
Trys pagrindiniai DNR išskyrimo etapai:
*Ląstelių ir branduolio [[lipidas|lipidinės]] [[membrana|membranos]] suardymas trinant, [[ultragarsas|ultragarsu]] ar [[detergentas|detergentais]] (SDS - Natrio dodecil/lauryl sulfatas); IGEPAL/NONIDET.
*Viduląstelinių ir histoninių [[baltymai|baltymų]] pašalinimas pridėjus proteinazę K ir juos precipituojant pridėjus [[natris|natrio] ar amonio acetato, arba taikant fenolio-chloroformo-(izoamilo alkoholio) išskyrimo etapą (susidaro dvifazis tirpalas: DNR (ir kt. druskos) ištirpsta vandeninėje fazėje, o baltymai lieka organinėje fazėje; žingsniai kartojami; gali būti naudojamas tirpalas 25:24:1).
*DNR precipitacija paveikus šaltu 96º etanoliu ar izopropanoliu (izopropilo alkoholiu) (DNR netirpsta alkoholyje ir iškrenta į nuosėdas; taip pat yra pašalinamos druskos)
| |||